ОПИСАНИЕ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ ОТДЕЛА
Ключевые слова
термофильные бактерии, гипертермофильные археи, анаэробы, литоавтотрофы, новые типы метаболизма, метаболизм С1 соединений, термофильные микробные сообщества, термостабильные ферменты, геномика, гетагеномика
Направления исследований
- Исследование филогенетического разнообразия термофильных прокариот
- Исследование метаболического разнообразия термофильных прокариот
- Характеристика новых типов катаболического обмена у термофильных микроорганизмов
- Использование С1 соединений термофильными прокариотами
- Восстановление неорганических акцепторов электронов термофильными прокариотами
- Характеристика глубоких филогенетических ветвей прокариот
- Анализ полных геномов новых термофильных прокариот
- Метагеномный анализ термофильных микробных сообществ
- Термостабильные гидролазы из новых термофильных прокариот
- Терминальные оксидоредуктазы термофильных прокариот
Основные методы исследований
В лаборатории налажен полный цикл выделения, культивирования и характеристики новых термофильных прокариот, в том числе анаэробов, микроорганизмов с газовым питанием, микроорганизмов, восстанавливающих нерастворимые акцепторы электронов. Имеется установка для анаэробного приготовления среды с заполнением свободного объема газовой смесью заданного состава, а также анаэробный перчаточный бокс «Inmed» для работы с анаэробными культурами и ферментами. Имеется проточный ферментер «Unfors» объемом 2.5 л для проточного культивирования термофилов (до 90оС) и облигатных анаэробов. Имеется 12 термостатов «Binder» и «Memmert», позволяющих культивирование термофильных микроорганизмов при заданных температурах от 40 до 110оС.
Методы характеристики новых изолятов:
- морфология клеток и мониторинг роста — световая фазово-контрастная микроскопия, флюоресцентная микроскопия
- характеристика метаболизма – ВЭЖХ, газо-жидкостная хроматография, спектрофотометрия
- характеристика целевых ферментов – зимография, спектрофотометрия
- геносистематическая характеристика новых изолятов – определение ГЦ состава ДНК и ДНК-ДНК гибридизация.
Методы характеристики микробных сообществ:
- выделение ДНК и РНК из природных сообществ и накопительных культур
- ПЦР-ДГГЭ генов 16S рРНК и функциональных генов
- транскриптомный анализ
- флюоресцентная гибридизация in situ (FISH, CARD-FISH)
Биоинформатические методы:
- определение филогенетического положения новых изолятов
- построение филогенетических деревьев на базе генов 16S рРНК и функциональных генов
- анализ баз данных
- разработка ПЦР-праймеров и зондов для анализа микробных сообществ
- анализ полных геномов новых изолятов, метагеномов и транскриптомов природных сообществ и накопительных культур
Краткая история отдела
В 2017 году лаборатория гипертермофильных микробных сообществ преобразована в отдел биологии экстремофильных микроорганизмов, в состав которой вошли две лаборатории: лаборатория разнообразия и экологии экстремофильных микроорганизмов и лаборатория метаболизма экстремофильных прокариот.
Лаборатория гипертермофильных микробных сообществ была организована в 1996 году из группы, входившей в состав лаборатории микробных сообществ (руководитель академик Г.А. Заварзин) и вошла в отдел микробных сообществ, также руководимый Г.А. Заварзиным. С 2012 года существует как самостоятельная лаборатория в составе ИНМИ РАН.
С момента основания лаборатории и до сегодняшнего дня ее руководителем является д.б.н. Е.А. Бонч-Осмоловская. За весь прошедший период лабораторию не покинул ни один ключевой сотрудник; была значительно расширена область компетенции членов лаборатории, которая, помимо классической микробиологии, включает теперь геномику, биоинформатику, энзимологию термофильных прокариот. Защищено 3 докторских и 9 кандидатских диссертаций. В 2014 году коллектив лаборатории получил грант президента РФ по поддержке ведущих научных школ.
ОСНОВНЫЕ ДОСТИЖЕНИЯ
Лаборатория занимается исследованием филогенетического и метаболического разнообразия термофильных прокариот, а также возможности их применения в биотехнологии. Основное внимание уделяется трудным для культивирования группам с необычным катаболизмом, а также представителям новых филогенетичских линий.
В рамках основного направления работы:
- Исследованы микробные сообщества природных термальных местообитаний различного происхождения и географического положения: наземные горячие источники вулканического и рифтового происхождения, морские мелководные и глубинные гидротермы, подземные высокотемпературные экосистемы. Сотрудниками лаборатории выделен, полностью охарактеризован и узаконен 91 новый таксон термофильных прокариот, в том числе новый филум, новый класс, 4 порядка, 3 семейства, 25 родов.
- Создана коллекция термофильных прокариот, включающая более 400 штаммов термофильных и гипертермофильных бактерий и архей.
- Выделены первые термофильные представители филума Planctomycetes.
- Охарактеризованы новые метаболические группы термофилов, в том числе анаэробные гидрогеногенные карбоксидотрофы, гипертермофильные археи, анаэробно использующие формиат с образованием водорода, термофильные железоредукторы, термофильные литоавтотрофные бактерии, осуществляющие дипропорционирование соединений серы.
Помимо классических культуральных методов, в лаборатории широко используются биоинформатический и молекулярно-экологический подходы:
- На основании анализа полных геномов новых термофильных прокариот выявлены генетические детерминанты гидрогеногенной карбоксидотрофии, а также новый тип катаболического обмена – анаэробное разложение формиата, идущее с образованием водорода, гены, обуславливающие способность к росту с нерастворимыми акцепторами электронов, в частности, с оксидом железа, гены, кодирующие новые гидролазы, в том числе архейную мультидоменную гликозидгидролазу.
- В геномах новых термофильных планктомицетов идентифицированы гены, кодирующие новые термостабильные гидролазы, впоследствии охарактеризованные экспериментально.
- Разработаны методы анализа микробных сообществ путем количественной оценки генов, кодирующих ключевые ферменты целевых микробиологических процессов.
- Путем анализа библиотек клонов генов mcrA из наземных горячих источников выявлены новые филогенетические группы метаногенных архей, доминирующие в этих местообитаниях. Выявлена новая группа термоацидофильных сульфатредукторов.
Прикладные исследования лаборатории связаны, в первую очередь, с поиском продуцентов новых термостабильных гидролаз для различных областей биотехнологии:
- Выделены и охарактеризованы гипертермофильные археи, способные росту за счет гидролиза целлюлозы и ксилана, а также термофильные и гипертермофильные прокариоты способные полностью разлагать устойчивые к гидролизу белки (альфа- и бета-кератины).
- Выделена первая факультативно-анаэробная термофильная бактерия Melioribacter roseus, способная в анаэробных условиях полностью окислять биополимеры, в том числе целлюлозу. Новым ферментам дана первичная биохимическая характеристика.
Лаборатория гипертермофильных микробных сообществ участвует в большом количестве российских и международных проектов. С 2012 по 2015 года лаборатория участвовала в Проекте “Hotzyme” (Systematic screening for novel thermostable hydrolases), в котором участвовало 13 рабочих групп из 10 стран, в том числе два индустриальных партнера (Sigma-Aldrich и Novozymes). В проекте лаборатория выполняла ключевую роль, обеспечивая доступ к новым термофильным микроорганизмам-гидролитикам и метагеномам из термальных местообитаний. В результате совместной работы консорциума выявлены и полностью охарактеризованы новые термостабильные гидролазы с заданными индустриальными партнерами свойствами.
За время существования лаборатории число сотрудников лаборатории выросло с 6 до 16 человек, под руководством которых сейчас выполняет диссертационные работы 6 аспирантов. 3 сотрудников защитили докторские диссертации, 9 – кандидатские. В 2012 году зав. лабораторией д.б.н. Е.А. Бонч-Осмоловская за выдающиеся достижения в области микробиологии стала лауреатом премии им. С.Н. Виноградского Президиума РАН. Сотрудники лаборатории ежегодно принимают участие в профильных международных научных мероприятиях – конгрессах ISME (Международное Общество микробной экологии), конгрессах “Extremophiles” и “Thermophiles”, где выступают с приглашенными пленарными и секционными докладами . В 2014 году лаборатория гипертермофильных микробных сообществ была главным организатором 10 Международного конгресса “Extremophiles-2014”, прошедшего в Санкт-Петербурге и собравшего 450 участников из 40 стран мира, в том числе 90 человек из различных научных и учебных учреждений РФ.
СОСТАВ ОТДЕЛА
Отдел биологии экстремофильных микроорганизмов (Заведующая: Бонч-Осмоловская Е.А.):
Лаборатория разнообразия и экологии экстремофильных микроорганизмов (Заведующий: Слободкин А.И.)
Лаборатория метаболизма экстремофильных прокариот (Заведующий: Кубланов И.В.)
№ |
ФИО |
Ученая степень, звание |
Должность |
Место работы |
Городской телефон |
Внутренний телефон |
E-mail |
1 | Бонч-Осмоловская Елизавета Александровна | д.б.н., профессор, член-корр. РАН | зав. отделом, г.н.с. | ИНМИ, комн. 313 | (499) 135-11-71 | 709 | elizaveta.bo@gmail.com |
2 | Слободкин Александр Игоревич | д.б.н. | зав. лабораторией, г.н.с. | ИНМИ, комн. 411 | (499) 135-73-75 | - | aslobodkin@hotmail.com |
3 | Фролов Евгений Николаевич | к.б.н. | зав. лабораторией | ИНМИ, комн. 106 | (499) 135-12-29 | 732 | evgenii_frolov_89@mail.ru |
4 | Гаврилов Сергей Николаевич | к.б.н. | с.н.с. | ИНМИ, комн. 113а | (499) 135-12-29 | 729 | sngavrilov@gmail.com |
5 | Ельченинов Александр Геннадиевич | к.б.н. | н.с. | ИНМИ, комн. 113а | (499) 135-12-29 | 729 | el.alexander92@yandex.ru |
6 | Заварзина Дарья Георгиевна | д.б.н., к.г-м.н. | с.н.с. | ИНМИ, комн. 206 | (499) 135-12-29 | 709 | zavarzinatwo@mail.ru |
7 | Заюлина Ксения Сергеевна | к.б.н. | н.с. | ИНМИ, комн. 113а | (499) 135-12-29 | 729 | zauylinakc@yandex.ru |
8 | Клюкина (Попова) Александра Антоновна | к.б.н. | с.н.с. | ИНМИ, комн. 106 | (499) 135-12-29 | 732 | alexandra.a.popov@ gmail.com |
9 | Кочеткова Татьяна Вячеславовна | к.б.н. | с.н.с. | ИНМИ, комн. 414 | (499) 135-12-29 | 709 | slepysh@gmail.com |
10 | Лебединский Александр Владимирович | к.б.н. | в.н.с. | ИНМИ, комн. 206 | (499) 135-12-29 | 709 | a.lebedinsky@mail.ru |
11 | Меркель Александр Юрьевич | к.б.н. | с.н.с. | ИНМИ, комн. 403 | (499) 135-81-01 | - | alexandrmerkel@gmail.com |
12 | Пихтерева Валерия Александровна | - | м.н.с. | ИНМИ, корп. 2, комн. 206 | - | - | pikhtereva.valeria@gmail.com |
13 | Подосокорская Ольга Андреевна | к.б.н. | с.н.с. | ИНМИ, комн. 113а | (499) 135-12-29 | 729 | podosokorskaya@gmail.com |
14 | Прокофьева Мария Игоревна | к.б.н. | н.с. | ИНМИ, комн. 206 | (499) 135-12-29 | 709 | prokofeva@gmail.com |
15 | Ратникова Наталия Михайловна | к.б.н. | н.с. | ИНМИ, комн. 403 | (499) 135-81-01 | - | n89ratnikova@gmail.com |
16 | Слободкина Галина Борисовна | д.б.н. | в.н.с. | ИНМИ, комн. 411 | (499) 135-73-75 | - | gslobodkina@hotmail.com |
17 | Соколова Татьяна Геннадиевна | д.б.н. | с.н.с. | ИНМИ, комн. 206 | (499) 135-12-29 | 709 | tatso2204@gmail.com |
18 | Хомякова Мария Александровна | к.б.н. | н.с. | ИНМИ, комн. 403 | (499) 135-81-01 | - | mary_klimova@mail.ru |
19 | Черных Николай Алексеевич | к.б.н. | с.н.с. | ИНМИ, комн. 412 | (499) 135-81-01 | - | chernyh3@yandex.ru |
МЕЖДУНАРОДНОЕ СОТРУДНИЧЕСТВО
№
|
Фонд/ программа
|
Акроним |
Наименование проекта на английском языке |
Наименование проекта на русском языке |
Период проведения работ |
Страны-участницы |
Сайт проекта |
1 |
Седьмая Рамочная Программа Европейского Сообщества |
Hotzyme |
Systematic screening for thermostable hydrolases |
Системный скрининг термостабильных гидролаз |
2012 – 2015 |
Дания, Нидерланды, Великобритания, Норвегия, Италия, Германия, Греция, Россия, Швейцария |
|
2 |
ERA.Net RUS Plus, РФФИ |
EXTREMOPHARM |
Bioprospecting of novel cytotoxic and biocidic secondary metabolites in extremophilic microorganisms |
Поиск новых цитотоксических и биоцидных вторичных метаболитов, продуцируемых экстремофильными микроорганизмами |
|
Russia, France, Germany |
|
НАГРАДЫ, ПРЕМИИ, ОТЛИЧИЯ, БЛАГОДАРНОСТИ (за научную и научно-организационную деятельность)
№ |
Сотрудники |
Вид премии/ награды |
Наименование премии/ награды |
Год присуждения |
1 |
Бонч-Осмоловская Е.А. |
Премия Президиума РАН |
Премия им. С.Н. Виноградского за выдающиеся достижения в области микробиологии |
2012 |