Лауреат конкурса В.Л. Кретовича

Научно-технический совет Института биохимии им. А.Н. Баха
своим решением на основании тайного голосования по докладу
«Изучение взаимодействия антител с вирусными и бактериальными антигенами  для создания экспрессных методов определения фитопатогенов»
присудил стипендию имени члена-корреспондента РАН В.Л. КРЕТОВИЧА на 2018 год Панфёрову Василию Геннадьевичу
(решение Совета от 26.01.2018 г.)

ПАНФЁРОВ

Василий Геннадьевич
м.н.с., аспирант 4 года обучения

лаборатория иммунобиохимии ФИЦ Биотехнологии РАН

научные руководители: зав. лаб., д.х.н., профессор Борис Борисович Дзантиев;
к.б.н. Сафенкова Ирина Викторовна

АННОТАЦИЯ РАБОТЫ

Работа посвящена характеристике взаимодействий антител и их конъюгатов с нанодисперсными маркерами с поливалентными корпускулярными антигенами и использовании полученных данных для разработки высокочувствительных методов иммунохроматографического анализа (ИХА). Для панели из шести вирусных и четырех бактериальных патогенов картофеля охарактеризована аффинность антител. Показана взаимосвязь между константами ассоциации/диссоциации иммунных комплексов нативных и меченых антител, с одной стороны, и чувствительностью иммуноанализа, с другой. Методами атомно-силовой микроскопии и капиллярного электрофореза изучен состав комплексов вирус – моноклональное антитело, образующихся при разных соотношениях реагентов. Сопоставлены условия формирования комплексов разного состава и размеров, описана аномальная электрофоретическая подвижность разветвленных иммунных агрегатов.

Разработаны монопараметрические иммунохроматографические системы для детекции десяти фитопатогенов картофеля. Предложены подходы, обеспечивающие 10-30 кратное снижение предела детекции в ИХА: агрегация функционализированных наночастиц золота и магнетита, увеличение размеров золотых наночастиц-маркеров осаждением на их поверхности солей серебра, усиление оптического сигнала с помощью фермерной метки – щелочной фосфатазы. Предложена методика полуколичественного ИХА Х вируса картофеля, позволяющая проводить оценку выраженности инфекции у пораженных растений. Разработан мультизонный формат ИХА для одновременного контроля 10 вирусных и бактериальных патогенов картофеля. Совместно с ВНИИ картофельного хозяйства и Всероссийским центром карантина растений проведена апробация разработанных тест-систем.

 

ПУБЛИКАЦИИ

Основные публикации:

  1. Panferov V.G., Safenkova I.V., Varitsev Y.A., Drenova N.V., Kornev K.P., Zherdev A.V., Dzantiev B.B. Development of the sensitive lateral flow immunoassay with silver enhancement for the detection of Ralstonia solanacearum in potato tubers. Talanta (2016) 152: 521–530.
  2. Safenkova I.V., Slutskaya E.S., Panferov V.G., Zherdev A.V., Dzantiev B.B. Complex analysis of concentrated antibody-gold nanoparticle conjugates’ mixtures using asymmetric flow field-flow fractionation. Journal of Chromatography A (2016) 1477: 56–63.
  3. Beloborodov S.S., Panferov V.G., Safenkova I.V., Krylova S.M., Dzantiev B.B., Krylov S.N. Unexpected electrophoretic behavior of complexes between rod-like virions and bivalent antibodies. Analytical Chemistry (2016) 88: 11908–11912.
  4. Panferov V.G., Safenkova I.V., Zherdev A.V., Dzantiev B.B. Setting up the cut-off level of a sensitive barcode lateral flow assay with magnetic nanoparticles. Talanta (2017) 164: 69–76.
  5. Panferov V.G., Safenkova I.V., Byzova N.A., Varitsev Y.A., Zherdev A.V., Dzantiev B.B. Silver-enhanced lateral flow immunoassay for highly-sensitive detection of potato leafroll virus. Food and Agricultural Immunology (2017) 29. DOI: 10.1080/09540105.2017.1401044.
  6. Razo S.C., Panferov V.G., Safenkova I.V., Varitsev Y.A., Zherdev A.V., Dzantiev B.B. Double-enhanced lateral flow immunoassay for potato virus X based on a combination of magnetic and gold nanoparticles. Analytica Chimica Acta (2018) 185. DOI: 10.1016/j.aca.2017.12.023.
  7. Panferov V.G., Safenkova I.V., Varitsev Y.A., Zherdev A.V., Dzantiev B.B. Enhancement of lateral flow immunoassay by alkaline phosphatase: a simple and highly sensitive test for potato virus X. Microchimica Acta (2018) 185, 83. DOI: 10.1007/s00604-017-2595-3.

Тезисы докладов:

Результаты работ были представлены на восьми научных конференциях

  1. Панфёров В.Г., Сафенкова И.В., Варицев Ю.А., Дренова Н.В., Корнев К.П., Жердев А.В., Дзантиев Б.Б. Разработка иммунохроматографической тест-системы с усилением серебром для определения Ralstonia solanacearum в клубнях картофеля. Сборник материалов XXVIII зимней молодежной научной школы «Перспективные направления физико-химической биологии и биотехнологии». 8-11 февраля 2016 г., Москва. С. 146.
  2. Панфёров В.Г., Сафенкова И.В., Варицев Ю.А., Дренова Н.В., Корнев К.П., Жердев А.В., Дзантиев Б.Б. Высокочувствительная диагностика бурой гнили картофеля методом иммунохроматографии. Тезисы докладов Международной научно-практической конференции «Биотехнология в комплексном развитии регионов». 15-17 марта 2016 г., Москва. С. 25.
  3. Сафенкова И.В., Панферов В.Г., Бызова Н.А., Варицев Ю.А., Зайцев И.А., Галушка П.А., Варицева Г.П., Усков А.Т., Жердев А.В., Дзантиев Б.Б. Экспрессный иммунохимический мультианализ вирусных и бактериальных патогенов картофеля. Тезисы докладов Международной научно-практической конференции «Биотехнология в комплексном развитии регионов». 15-17 марта 2016 г., Москва. С. 27.
  4. Safenkova I.S., Slutskaya E.S., Panferov V.G., Zherdev A.V., Dzantiev B.B. Asymmetric flow field-flow fractionation for characterization of highly concentrated conjugates of gold nanoparticles and antibodies. Book of Abstracts of the 18th International Symposium on Flow- and Field Based Separations (FFF2016). May 22-26, 2016. Dresden, Germany. Th. P4.
  5. Panferov V.G., Safenkova I.V., Zherdev A.V., Dzantiev B.B. Efficient formats of lateral flow immunoassay: The use of magnetic nanoparticles and controllable cut-off-levels. Point-of-Care Diagnostics, May 10-11, 2017. Munich, Germany. Abstracts of the Conference. P. 100.
  6. Панферов В.Г. Количественная характеристика единичных взаимодействий вирус-антитело и разработка иммунохимических мультиплексных систем детекции вирусных и бактериальных фитопатогенов. Сборник тезисов отчетной конференции аспирантов: 19-25 июня 2017 г.: Направление подготовки 06.06.01 «Биологические науки». М.: МАКС Пресс, 2017. С. 42-45.
  7. Razo S.C., Panferov V.G., Safenkova I.V., Zherdev A.V., Dzantiev B.B. Double enhancement based lateral flow immunoassay for potato virus X detection. Biocatalysis-2017: Abstracts of 11th International Conference “Biocatalysis: Fundamentals and Applications”. June 25-30, 2017, Moscow region, Russian Federation. Moscow: Innovations and High Technologies MSU Ltd, 2017. P. 190-191.
  8. Панферов В.Г., Сафенкова И.В., Разо Ш., Жердев А.В., Дзантиев Б.Б. Применение магнитных частиц для иммунохроматографического анализа Х вируса картофеля. Тезисы докладов Третьего съезда аналитиков России. 8-13 октября 2017 г., Москва. М.: ГЕОХИ РАН. 2017. Рег. № 533. С. 124.

Заявки на патенты:

  1. Панферов В.Г., Сафенкова И.В., Жердев А.В., Дзантиев Б.Б. Способ усиления серебром иммунохроматографического анализа для проведения количественных измерений с высокой точностью. Заявка на Евразийский патент на изобретение № 201501012 от 10.11.2015.
  2. Панферов В.Г., Разо Ш., Сафенкова И.В., Жердев А.В., Дзантиев Б.Б. Способ повышения чувствительности иммунохроматографического анализа поливалентных антигенов в «сэндвич»-формате, основанный на экспрессной предварительной инкубации. Заявка на патент РФ на изобретение № 2017147004 от 29.12.2017.

 

Подробная информация о стипендии имени члена-корреспондента РАН Вацлава Леоновича Кретовича: http://www.fbras.ru/meropriyatiya-centra/konkurs-kretovicha